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羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查-檢查項(xiàng)目-大眾養(yǎng)生網(wǎng)

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羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查

基本信息

  • 專科分類： 孕產(chǎn)檢查
  • 檢查分類： 基因檢測(cè)（DNA）
  • 適用性別： 女性
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術(shù)參考價(jià)： 150元
  • 科　室： 孕產(chǎn)檢查

羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查檢查簡(jiǎn)介

由于有害化學(xué)物質(zhì)、X線照射、環(huán)境因素影響，高齡妊娠，近親配婚等，導(dǎo)致妊娠時(shí)染色體的數(shù)目、形態(tài)、結(jié)構(gòu)及結(jié)合上發(fā)生變異所引起的疾病。羊水細(xì)胞的染色體檢查，對(duì)染色體疾病的產(chǎn)前診斷具有很大的特異性意義。

羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查檢查過程

羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查的測(cè)定原理：羊水細(xì)胞是胎兒皮膚、消化道、呼吸道和經(jīng)生殖泌尿系統(tǒng)脫落的細(xì)胞，95%左右是死細(xì)胞，因此必須經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)，使活的細(xì)胞得到充分的增殖，才能收獲細(xì)胞，進(jìn)行核型分析。

試劑：①F10培養(yǎng)液（如用RPMI1640，M199需加1mmol/L谷氨酰胺）pH6.5～6.8。②小牛血清。③Hanks平衡鹽溶液（10倍濃縮）：甲液：NaCl80g，KCl4g，MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，CaCl2·6H2O1.4g。將CaCl2溶于50ml三蒸水中，其它依次溶于400ml三蒸水中，兩液混合，加三蒸水至500ml，加氯仿1ml混勻，保存于4℃冰箱中。乙液：Na2HPO4·12H2O1.52g，KH2PO40.6g，葡萄糖10.0g，4g/L酚磺酞液50.0ml。依次溶于三蒸水400ml中，加三蒸水至500ml，加入氯仿1ml混勻，保存于4℃冰箱。Hanks平衡工作液：甲液1份，乙液1份，雙蒸水18份，混合后高壓滅菌，置4℃冰箱保存。使用前以50g/LNaHCO3溶液調(diào)至適當(dāng)pH。④4g/L酚磺酞液：酚磺酞0.4g置研缽中研碎，逐滴加入0.05mol/LNaOH22ml。

直到所有顆粒幾乎完全溶解，加入三蒸水至100ml，置棕色瓶中保存。⑤2.5g/L胰蛋白酶溶液：稱取胰蛋白酶250mg，溶于100mlHanks溶液中，過濾除菌，或用無鈣、鎂離子溶液配制。⑥無鈣、鎂離子溶液：NaCl8.0g，KCl0.2g，枸櫞酸鈉1.0g，NaH2PO4·H2O0.05g，NaHCO31.0g，葡萄糖1.0g。依次溶于三蒸水中，最后加三蒸水至1000ml，過濾除菌，貯存于4℃冰箱中備用。⑦EDTA胰蛋白酶溶液：貯存液：NaCl80g，KCl4g，葡萄糖10g，NaHCO35.8g，胰蛋白酶5.0g，EDTA2.0g。依次溶于900ml三蒸水中，并加4g/L酚磺酞5ml，加三蒸水至1000ml，抽濾除菌、分裝，凍存?zhèn)溆谩９ぷ饕海喝≠A存液1ml，加無菌三蒸水9ml即可。⑧雙抗溶液。⑨秋水仙素（10μg/ml）。

操作方法：

（1）取孕期16～20周羊水15～30ml，1000r/ml離心10min。

（2）棄去多余上清液，留1ml羊水和沉淀細(xì)胞，輕輕打散成細(xì)胞懸液。

（3）移入25ml方形培養(yǎng)瓶中，加pH6.5～6.8（含青霉素100U/ml，鏈霉素100μg/ml）的培養(yǎng)基3ml及小牛血清1ml，置37℃溫箱中培養(yǎng)。

（4）培養(yǎng)7～10天后可見大量成纖維樣或上皮樣細(xì)胞集落。此時(shí)可調(diào)換新鮮培養(yǎng)液。

（5）待細(xì)胞集落擴(kuò)大成片，并有許多透亮的圓形分裂細(xì)胞時(shí)，即可加入秋水仙素，使最終濃度為0.1～0.3μg/ml，置37℃溫箱中再培養(yǎng)5～6h（上述過程均在無菌條件下進(jìn)行）。收獲標(biāo)準(zhǔn)：①以成纖維細(xì)胞為主要類型，成片細(xì)胞生長(zhǎng)；②以10倍目鏡和20倍物鏡觀察，生長(zhǎng)的細(xì)胞克隆覆蓋1個(gè)或1個(gè)以上完整視野；③見到10個(gè)以上透亮的圓形細(xì)胞和10個(gè)以上雙圓形光亮的分裂細(xì)胞。

（6）如果細(xì)胞生長(zhǎng)不旺盛，生長(zhǎng)周期不齊或細(xì)胞老化，未達(dá)收獲標(biāo)準(zhǔn)，可在原瓶繼續(xù)傳代培養(yǎng)。方法：在無菌條件下先倒去培養(yǎng)液，加入2.5g/L無菌胰蛋白酶液數(shù)滴，搖動(dòng)后倒去。再加入胰蛋白酶5～10滴，在37℃下輕輕搖動(dòng)約5min，使貼壁細(xì)胞脫落。加入含小牛血清的新鮮培養(yǎng)基4ml，在37℃靜置培養(yǎng)4～5h。再小心更換培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，一般傳代后3～5天即可收獲。

（7）將培養(yǎng)液移至刻度離心管中，加ED-TA-胰蛋白酶液1ml于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，置37℃溫箱中5min，然后用彎頭吸管沖洗貼壁細(xì)胞（也可用2.5g/L胰蛋白酶溶液消化）。將脫離瓶壁的細(xì)胞倒入離心管中，與原培養(yǎng)液相混合，并用少量溫?zé)嵘睇}水沖洗培養(yǎng)瓶，洗下的細(xì)胞也一并倒入該離心管，以1000r/min離心10min。

（8）吸棄上清液，加入預(yù)溫37℃的0.075mol/LKCl低滲液3～5ml，置37℃10～15min。

（9）預(yù)固定、固定及制片均與外周血細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備法相同。

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推薦問答

問咽喉炎會(huì)引起咳嗽嗎
答

咽喉炎是一種常見的上呼吸道感染性疾病，主要表現(xiàn)為咽部不適、疼痛、干燥、異物感等癥狀。由于咽部黏膜受到炎癥刺激，患者常會(huì)出現(xiàn)咳嗽反射，以清除咽部分泌物和緩解不適感。咳嗽是咽喉炎的常見癥狀之一，但并非所有咽喉炎患者都會(huì)出現(xiàn)咳嗽。咳嗽的嚴(yán)重程度和持續(xù)時(shí)間因個(gè)體差異而異，部分患者可能僅表現(xiàn)為輕微咳嗽，而另一些患者則可能出現(xiàn)劇烈咳嗽。總之，咽喉炎確實(shí)可能引起咳嗽，但具體表現(xiàn)因患者而異。

問面部疼痛可能有哪些原因
答

面部疼痛可能由多種原因引起，包括神經(jīng)性疼痛如三叉神經(jīng)痛，可能與神經(jīng)受壓或炎癥有關(guān)；感染性疾病如牙周炎、鼻竇炎等，可能因感染引起的炎癥導(dǎo)致疼痛；外傷或手術(shù)后的神經(jīng)損傷；顳下頜關(guān)節(jié)紊亂綜合征，由于關(guān)節(jié)磨損或功能紊亂導(dǎo)致疼痛；以及某些系統(tǒng)性疾病如帶狀皰疹前期、偏頭痛等。每種情況都需要詳細(xì)的病史詢問、體格檢查和可能的輔助檢查來確定具體原因，并據(jù)此制定相應(yīng)的治療方案。

問感冒流清水鼻涕怎樣快速康復(fù)
答

感冒流清水鼻涕時(shí)，患者應(yīng)保持充足的休息，以增強(qiáng)機(jī)體免疫力。同時(shí)，多飲水，保持室內(nèi)空氣濕潤(rùn)，避免鼻腔干燥。飲食上應(yīng)選擇易消化、富含維生素的食物，以促進(jìn)身體恢復(fù)。若癥狀較重，可在醫(yī)生指導(dǎo)下使用對(duì)癥治療藥物，如解熱鎮(zhèn)痛藥、抗組胺藥等，以緩解不適。避免接觸過敏原和刺激性物質(zhì)，減少鼻腔刺激。在感冒初期，可采用物理降溫方法，如溫水擦洗，以降低體溫。若癥狀持續(xù)不緩解或加重，應(yīng)及時(shí)就醫(yī)，以免延誤病情。

問經(jīng)期能否服用藥物
答

經(jīng)期是否可以服用藥物需根據(jù)具體藥物和個(gè)體情況判斷。部分藥物如激素類藥物、抗凝血藥物等可能影響經(jīng)期出血量或周期，需在醫(yī)生指導(dǎo)下使用。而一些非處方藥物如止痛藥、抗過敏藥等，在無禁忌癥情況下可按需服用。經(jīng)期女性應(yīng)避免使用可能引起月經(jīng)不規(guī)律或加重經(jīng)期不適的藥物。總之，經(jīng)期用藥需謹(jǐn)慎，建議在醫(yī)生指導(dǎo)下合理用藥。

問感冒咳嗽患者能吃蘋果嗎
答

感冒咳嗽患者在飲食上應(yīng)選擇易消化、富含維生素的食物。蘋果是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的水果，含有豐富的維生素和礦物質(zhì)，對(duì)增強(qiáng)免疫力、緩解咳嗽癥狀有一定幫助。因此，感冒咳嗽患者適量食用蘋果是適宜的。但需注意，若患者伴有腹瀉等消化系統(tǒng)癥狀，應(yīng)減少蘋果的攝入量，以免加重腸胃負(fù)擔(dān)。同時(shí)，飲食調(diào)理不能替代藥物治療，患者應(yīng)及時(shí)就醫(yī)，遵循醫(yī)囑進(jìn)行綜合治療。

問如何正確讀取血壓計(jì)數(shù)值
答

正確讀取血壓計(jì)數(shù)值的方法如下：首先，確保患者處于安靜狀態(tài)，坐姿或臥姿均可，手臂放松，與心臟保持同一水平。然后，將血壓計(jì)袖帶固定在患者上臂，袖帶下緣距離肘窩約2厘米。接著，打開血壓計(jì)，開始充氣，使袖帶內(nèi)壓力逐漸升高，直至阻斷肱動(dòng)脈血流。隨后，緩慢放氣，觀察水銀柱或電子顯示屏上的數(shù)值變化。當(dāng)聽到第一個(gè)脈搏跳動(dòng)聲時(shí)，記錄此時(shí)的數(shù)值，即為收縮壓；繼續(xù)放氣，直至脈搏跳動(dòng)聲消失，記錄此時(shí)的數(shù)值，即為舒張壓。最后，重復(fù)測(cè)量2-3次，取平均值作為最終結(jié)果。

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