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血清乳酸脫氫酶-檢查項目-大眾養(yǎng)生網(wǎng)

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血清乳酸脫氫酶

基本信息

  • 專科分類： 心血管
  • 檢查分類： 生化檢查
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術(shù)參考價： 10元
  • 科　室： 心血管

血清乳酸脫氫酶檢查簡介

乳酸脫氫酶(LDH或LD)是糖無氧酵解及糖異生的重要酶系之一，可催化丙酮酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應(yīng)，也可催化相關(guān)的α-酮酸。LDH廣泛存在于人體組織中，以心、腎、骨骼肌含量最高，肝、脾、胰和肺組織次之。LDH測定方法主要有比色法和連續(xù)監(jiān)測法。

血清乳酸脫氫酶檢查過程

取材：血液

原理：

（1）比色法：LDH以NAD＋作氫的受體，催化乳酸脫氫，生成丙酮酸，后者與2，4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液呈紅色，根據(jù)顏色深淺求出酶活性。

（2）連續(xù)監(jiān)測法：LDH可催化L-乳酸生成丙酮酸，同時NAD＋還原成NADH，在340nm處吸光度的增高速率與酶活力成正比。

試劑：

（1）比色法：

①底物緩沖液（含0.3mol/L乳酸鋰，pH8.8）：取乳酸鋰2.88g，二乙醇胺2.1g，加蒸餾水約80ml溶解，以1mol/LHCl調(diào)pH8.8，加水至100ml。

②11.3mmol/L輔酶Ⅰ（NAD）溶液：稱氧化型輔酶Ⅰ15mg，溶于20ml蒸餾水中，冰箱保存可用2周。

③1mmol/L2，4-二硝基苯肼（DNPH）溶液：稱取DNPH200mg，加10mol/LHCl100ml，溶后加水至1000ml，置棕色瓶內(nèi)室溫保存。

④0.4mol/LNaOH溶液。

⑤1mmol/L丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)液：稱取丙酮酸鈉（AR級）11.0mg，以底物緩沖液溶解并稀釋至100ml，臨用前配制。

（2）連續(xù)監(jiān)測法：

①55mmol/L乳酸鋰Tris緩沖液：稱取乳酸鋰5.28g，Tris6.68g，溶于800ml蒸餾水中，在37℃水浴箱中用1mol/LHCl調(diào)pH至8.9（約需46ml），加水至1000ml，冰箱保存。

②12mmol/LNAD溶液：稱取NAD79.6mg，溶于10ml蒸餾水中，冰箱保存可用2周。

③基質(zhì)應(yīng)用液（含NAD6mmol/L）：根據(jù)當(dāng)天用量將上述NAD溶液和乳酸鉀Tris緩沖液等量混合即可。商品試劑盒按其說明溶解，恢復(fù)至室溫25℃使用。

操作方法：

（1）比色法：按表1操作。

混勻，室溫放置5min后，在440nm波長，比色杯光徑1.0cm，蒸餾水調(diào)零點，讀取各管吸光度，以AU-AC之差值查標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出LDH活力單位。

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