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不孕不育的免疫學(xué)檢查-檢查項(xiàng)目-大眾養(yǎng)生網(wǎng)

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不孕不育的免疫學(xué)檢查

基本信息

  • 專科分類: 優(yōu)生優(yōu)育
  • 檢查分類: 體液檢查
  • 適用性別: 男女均適用
  • 是否空腹:  空腹
  • 手術(shù)參考價(jià): 220元
  • 科 室: 優(yōu)生優(yōu)育

不孕不育的免疫學(xué)檢查檢查簡(jiǎn)介

不孕不育的免疫學(xué)檢查包括男性抗精子自身免疫不育、女性抗精子同種免疫不育和女性抗透明帶免疫不育。

不孕不育的免疫學(xué)檢查檢查過程

—、抗精子免疫不育的檢查

抗精子免疫包括抗精子體液免疫(抗精子抗體)和抗精子細(xì)胞免疫。

(二)抗精子抗體的檢測(cè)

1,性交后試驗(yàn)于性交后6~24h內(nèi)取宮頸粘液,在高倍鏡下觀察計(jì)數(shù)精子數(shù)。每高倍視野中,有≥21條極度活潑的精子者特異性因素干擾。若血清效價(jià)≥1:32,則可認(rèn)為確含精子抗體。其他尚有毛細(xì)管凝集法及平板凝集法,較少用。

2.補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒試驗(yàn)及精子制動(dòng)試驗(yàn)精子抗體與精子抗原結(jié)合,激活補(bǔ)體系統(tǒng),導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性及完整性的損害,若為制動(dòng)抗體,使精干失去活動(dòng)力,制動(dòng)值≥2為陽性;若為細(xì)胞毒抗體,則用某些染料染色陽性,要求精子活率>70%。微量法僅需樣本幾微升,對(duì)精子活動(dòng)率較低的樣本,可用上游法提取活精子,活率可達(dá)90%以上。奉法僅能檢測(cè)作用于精子尾干的抗體。特異性強(qiáng),敏感性差,假陰性率較高。

3,被動(dòng)血凝法用精子提取物及精漿包被經(jīng)處理的紅細(xì)胞使之致敏,將致敏紅細(xì)胞與待測(cè)稀釋血清在微量反應(yīng)板上進(jìn)行反應(yīng),出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集為陽性。此法不受精子活率、計(jì)數(shù)、精掖中微生物或組織碎片的影響,研究者認(rèn)為此法特異、敏感,但報(bào)道較少,其可靠性及實(shí)用性尚待證實(shí)。

4.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)及生物素—親合素酶聯(lián)免疫吸附法(BA—ELISA)應(yīng)用完整精干或精子膜抗原包被固相載體,待測(cè)樣本中精子抗體與之培養(yǎng)后可結(jié)合于抗原表面。隨之酶標(biāo)第二抗體亦可結(jié)合其表面,后經(jīng)加酶底物,根據(jù)底物顯色情況判斷結(jié)果。可用肉眼觀察,亦可用酶標(biāo)儀測(cè)定,后者客觀準(zhǔn)確,一般以大于一組陰性血清光密度均值加2倍標(biāo)準(zhǔn)差為陽性。由于完整精子包被易致非特異性吸附.因此若以可溶性精子膜抗原包被,則本法敏感、特異、客觀、定量,能確定抗體類型,且易操作。BA—ELISA是在常規(guī)ELISA基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新一代定量檢測(cè)法,其敏感性、特異性超過常規(guī)法。

5.免疫珠試驗(yàn)(1mmunbeadTest,IBT)用抗人免疫球蛋白抗體包被的聚丙烯酰胺微球能結(jié)合于結(jié)合了精子抗體的精子表面,在相差顯微鏡或電子顯微鏡下可見到免疫珠隨精子運(yùn)行,若結(jié)合一個(gè)或多個(gè)免疫珠的精子比例≥10%為陽性。此法可確定抗體的部位、類型及結(jié)合精子的比例,能測(cè)出活精子表面結(jié)合的抗體。其敏感性、特異性及重復(fù)性較好,操作稍繁瑣,檢測(cè)所需樣本少,可用于宮頸粘液、輸卵管液等微量樣本的檢測(cè)。

6.放射性標(biāo)記免疫球蛋白或A蛋白法同位素標(biāo)記的抗人免疫球蛋白或葡萄球苗A蛋白與結(jié)合在精子表面的精子抗體結(jié)合,用x計(jì)數(shù)器測(cè)定精于表面的放射活性。若以活精子作為抗原,其特異性及敏感性較高,且可確定抗體類型。但由于每次實(shí)驗(yàn)活精子來源不同,其結(jié)果重復(fù)性較差;且設(shè)備昂貴.操作者易受放射性損害,故此法報(bào)道較少。

7,間接免疫熒尤試驗(yàn)精于表面結(jié)合于抗原后,能與標(biāo)有熒光素的第二抗體結(jié)合,在熒光顯微鏡下觀察呈現(xiàn)熒光的陽性精子比例。因試驗(yàn)中需要甲醇固定致精于膜損傷,內(nèi)部抗原外露,而抗內(nèi)部抗原的抗體在冗常人中普遍存在,故假陽性太高,無臨床實(shí)用價(jià)值。近年來,作液相培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)過程中無需固定,又重新確定了本法的使用價(jià)值。

8.精卵相互作用直接檢查法

(1)精子—透明帶結(jié)合或穿透試驗(yàn):自腹腔鏡檢查中獲得的人卵與精于在一定條件F孵育后,觀察精子能否穿過透明帶進(jìn)入卵細(xì)胞周圍的空間,若精子不能穿過透明帶,考慮有制動(dòng)抗體存在。此試驗(yàn)亦受其它因素干擾。

(2)精子—去透明帶倉鼠卵穿透試驗(yàn)(SPA):將優(yōu)化提取的活精子與無帶倉鼠卵混合孵育,在相差顯微鏡下觀察,若卵內(nèi)含腫脹精子頭(帶尾)為已經(jīng)穿透。SPA可用于判定:①有精漿抗體的精子的受精能力;②各種抗體在阻止受孕時(shí)的重要性。此試驗(yàn)也可受多種因素影響。

(二)抗精子細(xì)胞免疫的檢測(cè)

對(duì)細(xì)胞介導(dǎo)的抗精干免疫的研究資料較少,各家結(jié)論不一。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及人體檢測(cè)表明,抗精于細(xì)胞免疫可能是不育的原因之一。檢測(cè)細(xì)胞介導(dǎo)抗精于免疫反應(yīng)的試驗(yàn)主要有淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)、白細(xì)胞粘附抑制試驗(yàn)、白細(xì)胞或巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制試驗(yàn)、皮膚試驗(yàn)及外周血白細(xì)胞促凝血活性法等。所采用的抗原不一,有新鮮洗滌精子、凍融精子、半純化精于等。目前,因使用的抗原不統(tǒng)一,檢測(cè)方法各異,研究例數(shù)較少,各種方法的特異性尚難評(píng)價(jià),其結(jié)果亦難于比較。

二、抗透明帶免疫性不孕癥的檢測(cè)

人卵透明帶來源有限,很難獲取,但人透明帶與豬透明帶問有交叉抗原性,因此實(shí)際丁作中均用豬透明帶代替人卵透明帶用下檢測(cè)人血清中透明帶抗體。由于部分正常人血清中存在異種凝集素(主要為IgM)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,因此檢測(cè)前需用新鮮豬紅細(xì)胞吸收待測(cè)血清。

1、透明帶沉淀反應(yīng)透明帶表面結(jié)合抗體后,在光鏡或暗視野鏡下呈現(xiàn)折光改變。本法多用于鑒定血清,敏感性低,難用于臨床。

2.放射免疫法用放射性標(biāo)記的豬透明帶抗原與待測(cè)血清培養(yǎng)后,分離出抗原抗體復(fù)合物,測(cè)定其放射活性。本法能定量,特異性及敏感性較好,但由于放射性損害,且報(bào)道不多,故本法尚難肯定。

3.間接免疫熒光試驗(yàn)人抗透明帶抗體結(jié)合至豬卵表面后,標(biāo)有熒光素的抗人免疫球蛋白抗體隨之結(jié)合至透明帶表面,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)明顯的卵周熒光。本法的可靠性有賴于其它客觀方法證實(shí)。

4.ELISA及BALISA法以豬透明帶抗原包被固相載體,另加待測(cè)血清、酶標(biāo)第二抗體及底物,分步培養(yǎng)洗滌,最后根據(jù)底物顏色變化情況判斷結(jié)果。本法所需樣本量少,無需特殊設(shè)備,操作簡(jiǎn)便,能定量測(cè)定抗體并確定抗體類型,特異性及敏感性較好。BA—ELISA具有常規(guī)ELISA的優(yōu)點(diǎn),而其敏感性大為提高。

5.被動(dòng)血凝法用純化的豬透明帶抗原包被其他物種的紅細(xì)胞為抗原靶標(biāo),在存在透明帶抗體的情況下,致敏紅細(xì)胞發(fā)生凝集。此法研究報(bào)道較少,難以評(píng)價(jià)其敏感性和特異性。

6.精子—透明帶結(jié)合或穿透試驗(yàn)若存在透明帶抗體或抗精子抗體,此法均可陽性。由于試驗(yàn)受培養(yǎng)環(huán)境因素影響較大,故對(duì)不同實(shí)驗(yàn)室的研究結(jié)果難以比較。此法可與其它方法配合應(yīng)用,相互補(bǔ)充,以保證結(jié)果的可靠性。

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