B淋巴細胞表面標志

B淋巴細胞表面標志注意事項

(1)熒光抗體試劑中存在凝聚IgG的影響，凝聚IgG可以和B細胞表面Fc受體結合出現假陽性，因此，為避免出現凝聚IgG須注意：

①不能使用F/P克分子比值過高的熒光抗體，一般以1～3為宜。

②含低濃度蛋白的熒光抗體低溫保存不穩定，一般不應低于2mg/ml。

③低溫保存的熒光抗體不可反復凍融，使用前150000r/min離心30min，除去凝聚物。

(2)活的淋巴細胞作免疫熒光染色時，在全部試劑中(標記抗體、Hank液等)均需加NaN3，以限制細胞膜的流動性。否則會出現帽狀熒光和吞噬現象，熒光細胞實際數下降。

(3)用抗IgG熒光抗體染色時，可由于標本中含有抗原一抗體(IgG型)免疫復合物與B細胞表面Fc受體結合，表現為熒光陽性。為此，有人建議用熒光標記抗F(ab)2抗體染色，以排除Fc受體被著染。

(4)如果當天不能觀察標本，則將細胞懸于熒光抗體保存液中，4℃存放，次日計數。

近年來由于抗B細胞表面特異分子(CD19、CD20等)單克隆抗體的問世，因而人們開始傾向于應用熒光素標記的抗CD19或CD20的單克隆抗體直接與外周血淋巴細胞反應;或用抗CD19和CD20的單克隆抗體(第一抗體)先與淋巴細胞反應，再與熒光素標記的兔或羊抗鼠IgG(第二抗體)結合，熒光顯微鏡下計數或流式細胞術來計數外周血B淋巴細胞。

B淋巴細胞表面標志不宜人群

暫無禁忌人群。

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