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β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶-注意事項-大眾養生網

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β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶注意事項

(1)對硝基酚比色法：

①基質對硝基酚應純化，配制前置50℃烘24h。用10mmol/LNaOH配成0.04mmol/L濃度，用窄帶寬分光光度計掃描吸收曲線，λmax=401nm，根據IFCC標準，Aλmax=0.7316～0.7388，Eλmax=18380±90(25℃)。根據對硝基酚的摩爾吸光系數，計算NAG活性單位的公式為：

以上公式是根據IFCC的標準E值計算的，各實驗室應根據具體儀器條件測定E值，建立計算式。

②底物溶解度小，配制時應先用適量pH4.6緩沖液調成糊狀，再逐漸加緩沖液至所需量。

③測定結果超線性范圍時，應將標本用生理鹽水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數。

④尿酶濃度受尿量影響較大，應留取24h尿量。若以NAG/g肌酐比值計算酶排出率，即不受尿濃縮或稀釋的影響，又不需留24h尿。

(2)熒光光度法：

①熒光法測NAG已有國產試劑盒，其敏感度高，不受尿色干擾。

②也可用上海第三分析儀器廠產930熒光光度計，激發濾光片360，發射濾光片用(400+450)復合，效果滿意。

③本法酶反應液中各成分濃度為：底物1.33mmol/L，枸櫞酸20mmol/L，Na2HPO432mmol/L。

④配試劑所用溶劑應用重蒸餾水，底物應無游離4-MU，BSA中應無該酶或用50℃加熱2h滅活。

⑤血清中NAG于4℃穩定數小時至數天，-20℃可穩定數月。尿標本4℃穩定1周，也可用枸櫞酸鹽抗凝血漿。

⑥β-N-乙酰氨基葡萄糖苷可被二種酶催化水解，一種是β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.30)，另一種是β-N-乙酰已糖苷酶(EC3.2.1.52)，只有對提純的酶才能限定EC3.2.1.30或EC3.2.1.52。目前國內文獻中常稱的NAG，嚴格地說是按所用底物命名的，而不是指酶對底物的特異性。所以目前國外文獻常泛稱β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。

β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶不宜人群

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