三級甲等綜合醫(yī)院國營
北京協(xié)和醫(yī)院是集醫(yī)療、教學、科研于一體的現(xiàn)代化綜合三級甲等醫(yī)院,是國家衛(wèi)生健康委指定的全國疑難重癥診治指導中心,最早承擔高干保健和外賓醫(yī)療任務的醫(yī)院之一,也是高等醫(yī)學教育和住院醫(yī)師規(guī)范化培訓國家 級
ELISA中的主要試劑成份如抗原、抗體、酶結合物、底物等,如制備不當或保存不妥,均易變質失活。ELISA的步驟多,操作如不合規(guī)范,難于得到準確的結果。因此為保證檢測的有效性,每次試驗必須進行質量控制。優(yōu)良的試劑盒中提供的陽性對照和陰性對照一般可作為試驗的質控品,按其說明操作,從所得的吸光度值可以判斷試驗的有效性。以臨床檢驗中最常用的HBsAg檢測為例,試劑盒中的陰性對照應為HBsAg陰性的人血清,陽性對照應標明HBsAg含量(例如9±2ng/ml)。每批試驗應同時作3份陰性對照和二份陽性對照。陰性對照測定所得吸光度值應小于某一數(shù)值(例如0.100),而陽性對照吸光度均值減去陰性對照吸光度均值應大于某一數(shù)值(例如0.200)。這些數(shù)值為該試劑盒在規(guī)定的測定條件下,特定的實驗值。因此如測定結果符合要求,既表明所用試劑的有效性,又表明操作的正確性,只有在這種情況下,該批試驗方為有效。
有的試劑盒中所含陽性對照和陰性對照不符合作為質控品的要求,或實驗室的測定條件如比色計等,與試劑盒說明中的不同,則應根據(jù)實際情況采用合適的質控品和從實驗得出的本實驗室的質控值。商品的質控血清價格昂貴。定性測定ELISA的質控品一般可自行制備。仍以HBsAg檢測為例。陰性對照可取自用高質量試劑檢測為HBsAg陰性的獻血員。陽性對照的制備可在陰性對照血清中加入適量的HBsAg陽性血清,將此混合血清與參照標準品或定量質控品作對比測定,標定其HBsAg含量。然后進行適當?shù)南♂專玫剿铦舛鹊腍BsAg陽性血清,再加入適量抗菌防腐劑如慶大霉素和柳硫汞后,分裝低溫凍存。
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