三級甲等綜合醫(yī)院國營
北京協(xié)和醫(yī)院是集醫(yī)療、教學(xué)、科研于一體的現(xiàn)代化綜合三級甲等醫(yī)院,是國家衛(wèi)生健康委指定的全國疑難重癥診治指導(dǎo)中心,最早承擔(dān)高干保健和外賓醫(yī)療任務(wù)的醫(yī)院之一,也是高等醫(yī)學(xué)教育和住院醫(yī)師規(guī)范化培訓(xùn)國家 級
(1)葡萄糖鄰甲苯胺(O~TB)法測定:
①除葡萄糖外,其他糖在反應(yīng)過程中亦能產(chǎn)生有色化合物,它們吸光度比率分別為:葡萄糖=1.00;果糖=0.06;甘露糖=0.96;半乳糖=1.42;蔗糖=0.16;麥芽糖=0.09;乳糖=0.39;木糖=0.12。但是,在這些糖中葡萄糖、果糖和半乳糖存在于正常人血清,而后者在正常人血液中含量甚微,不影響實(shí)際測定結(jié)果。
②測定液的顯色強(qiáng)度與反應(yīng)條件有關(guān),鄰甲苯胺的批號、鄰甲苯胺試劑的新、老(如試劑配制后過久,顏色變淺)以及加熱溫度和加熱時(shí)間等都會影響顯色強(qiáng)度。因此,測定管,標(biāo)準(zhǔn)管、空白管的加熱時(shí)間與溫度必須完全一致。每批測定管數(shù)不宜過多,以便能較好地控制反應(yīng)條件。有些批號冰醋酸會產(chǎn)生棕色反應(yīng),影響測定結(jié)果。
③最終反應(yīng)液偶爾會產(chǎn)生混濁,最常見原因是高脂血癥。此時(shí),可向3ml顯色液中加入1.5ml異丙醇,充分混勻,溶解脂質(zhì)可消除濁度,所測吸光度乘以1.5。注射右旋糖酐時(shí),由于右旋糖酐不溶于鄰甲苯胺試劑而產(chǎn)生混濁。冷水浴太冷時(shí)也可出現(xiàn)混濁。
④輕度溶血不影響測定,但1g/L血紅蛋白能假性增高葡萄糖測定結(jié)果
0.11mmol/L,膽紅質(zhì)也能增高測定管吸光度,342μmol/L膽紅質(zhì)能假性增高葡萄糖測定結(jié)果1.39mmol/L,血標(biāo)本中含有EDTA(>1mg/ml),氟化鈉(>5mg/ml)時(shí),能增高顯色強(qiáng)度,麝香草酚抑制顏色生成。
⑤鄰甲苯胺法的測定結(jié)果基本上與葡萄糖氧化酶法和已糖激酶法相同,但尿毒癥患者,鄰甲苯胺法的測定結(jié)果略有偏高。
⑥鄰甲苯胺試劑有毒并有致癌性,操作應(yīng)避免皮膚接觸或直接吸入。
(2)葡萄糖氧化酶(GOD)法:
①葡萄糖氧化酶對β-D葡萄糖高度特異,溶液中葡萄糖約36%為α型,64%為β型。葡萄糖的完全氧化需要從α型到β型的變旋反應(yīng)。國內(nèi)某些商品葡萄糖氧化酶試劑盒含葡萄糖變旋酶,可加速這一反應(yīng),但在終點(diǎn)法中延長孵育時(shí)間可達(dá)到完成自發(fā)變旋過程。新配制的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液主要是α型,故須放置2h以上(最好過夜),待變旋平衡后方可應(yīng)用。
②葡萄糖氧化酶法測定的特異性較高,能干擾測定結(jié)果的物質(zhì)很少,溶血標(biāo)本血紅蛋白的濃度達(dá)10g/L,黃疸標(biāo)本膽紅質(zhì)濃度達(dá)342μmol/L。氟化鈉濃度達(dá)2g/L,尿素濃度達(dá)46.7mmol/L(280mg/dl),尿酸濃度達(dá)2.95mmol/L,半胱氨酸的濃度達(dá)50mg/dl,甘油三酯濃度達(dá)500mg/dl,對測定結(jié)果均無影響,維生素C、谷胱甘肽、10mg/dl左旋多巴可能引起測定結(jié)果的負(fù)偏差。
③如果測血漿中糖,標(biāo)本以草酸鉀-氟化鈉為抗凝劑較好。取草酸鉀6g,氟化鈉4g,加水溶解至100ml,吸取0.1ml到玻璃試管內(nèi),在80℃以下烤干使用,可使2~3ml血液在3~4h不凝固并抑制糖分解。
④方法學(xué)評價(jià):GOD法線性范圍至少可達(dá)19mmol/L;回收度94%~105%;變異系數(shù)批內(nèi)為0.7%~2.0%;批間為2%左右;日間為2%~3%。準(zhǔn)確度與精密度都能達(dá)到臨床需要,操作簡便,適用于常規(guī)檢驗(yàn)。
1、服用過避孕藥、甲狀腺激素、甾體激素等藥物的患者,因?yàn)榭赡軙绊懙綑z查結(jié)果,禁止近期有以上藥物服藥史的患者檢查。
2、特殊疾病:患有造血功能減低疾病的患者,比如白血病,各種貧血,骨髓增生異常綜合癥等,除非該檢查必不可少,盡量少抽血。
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