三級(jí)甲等綜合醫(yī)院國(guó)營(yíng)
北京協(xié)和醫(yī)院是集醫(yī)療、教學(xué)、科研于一體的現(xiàn)代化綜合三級(jí)甲等醫(yī)院,是國(guó)家衛(wèi)生健康委指定的全國(guó)疑難重癥診治指導(dǎo)中心,最早承擔(dān)高干保健和外賓醫(yī)療任務(wù)的醫(yī)院之一,也是高等醫(yī)學(xué)教育和住院醫(yī)師規(guī)范化培訓(xùn)國(guó)家 級(jí)
主要分五項(xiàng)檢查:
一、細(xì)胞總數(shù)
1、直接計(jì)數(shù)法適用于腦脊液標(biāo)本比較清亮或微混。用滴管吸取已混勻的腦脊液標(biāo)本少許,直接滴入細(xì)胞計(jì)數(shù)板,充入計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置2~3分鐘,低倍鏡下計(jì)數(shù)兩個(gè)池內(nèi)的四角和中央大格共10個(gè)大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù),即為1μl腦脊液中的細(xì)胞總數(shù)(紅、白細(xì)胞總數(shù))。在書寫報(bào)告時(shí),再換算成每升腦脊液中的細(xì)胞總數(shù)。
2、稀釋計(jì)數(shù)法適用于如果腦脊液的細(xì)胞過(guò)多、混濁或帶血的腦脊液。可用血紅蛋白毛細(xì)吸管吸取混勻的腦脊液20μl,加入有紅細(xì)胞稀釋液0.38μl的小試管中,混勻后滴入計(jì)數(shù)池內(nèi),用低倍鏡計(jì)數(shù)4個(gè)大方格的細(xì)胞總數(shù),乘以50,即為每微升腦脊液的細(xì)胞總數(shù),最后換算成每升腦脊液的細(xì)胞總數(shù)報(bào)告。
二、白細(xì)胞計(jì)數(shù)
1、直接計(jì)數(shù):非血性標(biāo)本,用吸管吸取冰乙酸后全部吹出,使管壁僅附著少許冰乙酸,然后用同一吸管吸取少量混勻的腦脊液標(biāo)本,數(shù)分鐘后紅細(xì)胞就會(huì)完全溶解,再滴入計(jì)數(shù)池內(nèi),按上法計(jì)數(shù)。
2、稀釋計(jì)數(shù):如白細(xì)胞過(guò)多,可用白細(xì)胞稀釋液稀釋后,按上法計(jì)數(shù),注意計(jì)數(shù)結(jié)果應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
3、血性標(biāo)本的校正計(jì)數(shù):混有血液的腦脊液標(biāo)本混勻后,用1%的冰乙酸溶液稀釋后仍按上法計(jì)數(shù)。為了剔除因出血而帶來(lái)的白細(xì)胞,可用下式進(jìn)行校正。每微升CSF內(nèi)白細(xì)胞校正數(shù)=每微升CSF未校正的白細(xì)胞數(shù)-
三、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)
1、直接分類法:在白細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后,轉(zhuǎn)高倍鏡觀察,依據(jù)細(xì)胞形狀和細(xì)胞核的形態(tài)進(jìn)行分類,共計(jì)數(shù)白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞100個(gè),分別計(jì)算單個(gè)核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞所占的比例,以百分?jǐn)?shù)表示。如白細(xì)胞總數(shù)不足100個(gè),則直接寫出單個(gè)核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的具體數(shù)字。如白細(xì)胞總數(shù)在30以下,可不做直接分類計(jì)數(shù)或改用染色分類計(jì)數(shù)。
2、染色分類法:腦脊液標(biāo)本離心,取沉淀涂片,制成均勻薄膜,置室溫或37℃孵箱中,干燥后以瑞氏染色,油鏡下進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。以百分比表示之。
四、病原體形態(tài)學(xué)檢查
1、細(xì)菌臨床懷疑流行性腦脊髓膜炎或化膿性腦脊髓膜炎時(shí),應(yīng)做細(xì)菌學(xué)涂片檢查。操作如下:
(1)腦脊液標(biāo)本2~3ml,以3000rpm離心15分鐘,去上清液,將沉淀物涂在潔凈玻璃片上,共制片2張,涂片自然或在37℃溫箱中干燥固定,且勿用火焰固定。
(2)涂片固定后,一張用亞甲藍(lán)染色,另一張用革蘭氏染色。
(3)革蘭氏染色涂片用于檢查肺炎雙球菌、流感桿菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、鏈球菌、大腸桿菌等,亞甲藍(lán)染色用于檢查腦膜炎雙球菌。如找到細(xì)菌,則按其染色性質(zhì)及形態(tài)報(bào)告。
(4)如懷疑結(jié)核性腦膜炎,可將腦脊液標(biāo)本靜置24小時(shí),取其液面薄膜涂片,置37℃溫箱中干燥固定,作抗酸染色,油鏡下找抗酸桿菌。
(5)采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意污染。顯微鏡觀察時(shí)應(yīng)注意細(xì)胞內(nèi)外的細(xì)菌形態(tài),報(bào)告時(shí)應(yīng)予以描述。
2、真菌檢查—新型隱球菌的檢查
(1)取腦脊液標(biāo)本,以2000rpm離心10分鐘,沉淀物涂片,加經(jīng)過(guò)過(guò)濾的優(yōu)質(zhì)細(xì)墨汁一滴,混合后加蓋玻片顯微鏡下檢查。
(2)先用低倍鏡觀察,如發(fā)現(xiàn)在黑色背景下有圓形透光小點(diǎn),中間有一細(xì)胞大小的圓形物質(zhì),即轉(zhuǎn)用高倍鏡仔細(xì)觀察其結(jié)構(gòu),新型隱球菌直徑5~20μm,可見(jiàn)明顯的厚夾膜,周圍有較強(qiáng)的折光,并有出芽的球形孢子。
(3)發(fā)現(xiàn)上述特征,即可報(bào)告墨汁涂片找到“隱球菌屬”。并須進(jìn)一步作真菌培養(yǎng)。
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